速遞：據(jù)了解，誘導多能干細胞可以幫助人類了解細胞“變身”的奧秘，為科學界提供了一個窺探生命本質(zhì)的窗口。多能干細胞還可以用于再生新的組織和器官，為疾病治療和再生醫(yī)學提供“種子”細胞來源。中國科學院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院研究員裴端卿的科研團隊經(jīng)過5年攻關，揭示了化學方法制備干細胞的科學原理，開發(fā)了簡單、、標準化制備干細胞的方法（一套、簡單的化學小分子誘導多能干細胞的方法， 簡稱為CIP（Chemical Induction of Pluripotency），即化合物誘導干細胞多能性。），為誘導多能干細胞的研究和優(yōu)化制備途徑提供了全新的科學視角和解決方案。——摘自《細胞-干細胞》

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3T3L1細胞

3T3L1細胞|細胞株

3T3L1細胞 【培養(yǎng)指南】

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3T3L1細胞 【細胞凍存】

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

3T3L1細胞 【復蘇的原則】

快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使3T3L1細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。

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3T3L1細胞 【注意事項】

拜力生物實驗室專業(yè)人士提醒廣大科研實驗者，購買3T3L1細胞培養(yǎng)，注意事項：

1. 收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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小徐20180410